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熒光素酶穩(wěn)定長期供
熒光素酶穩(wěn)定長期供
產(chǎn)品價格:¥1(人民幣)
  • 規(guī)格:完善
  • 發(fā)貨地:湖北武漢市
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  • 最小起訂量:1千克
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    商鋪名稱:湖北貓爾沃生物醫(yī)藥有限公司

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    商品詳情
      作為FL生產(chǎn)原料的螢火蟲,要依靠人工捕捉或養(yǎng)殖,受地域和季節(jié)性限制,且該生物生產(chǎn)周期長、養(yǎng)殖成本高、提取的酶成分復(fù)雜,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,人們轉(zhuǎn)向用基因工程的方法進行生產(chǎn)。1985年,deWet,J.R.等克隆了P.Pyralis的FL基因,并在大腸桿菌(Escherichiacoli)中表達,從中得到具有活性的FL。1986年,他們測定了FL基因的cDNA序列。隨后,各種發(fā)光甲蟲的FL基因相繼克隆成功,并能在原核和真核表達系統(tǒng)中表達。取自P.Pyralis長約1.8kb的cDNA基因在E.coli表達的產(chǎn)物是分子量為6Chemicalbook2kD,含550個氨基酸的多肽鏈,與自然提取得到的FL相比,具有同樣的反應(yīng)動力學(xué)特性和發(fā)射波長,在相同的反應(yīng)條件下酶的穩(wěn)定性亦無差異。螢火蟲熒光素酶基因通過克隆在E.coli表達,轉(zhuǎn)化體在37℃、LB培養(yǎng)基中生長到對數(shù)后期收集菌體,用滲透壓法、凍融法提取細菌胞質(zhì)組分,經(jīng)均質(zhì)、離心,用凝膠排阻、離子交換色譜提取純酶,冷凍干燥保存。BL可從培養(yǎng)發(fā)光細菌直接提取得到,其制備方法與FL類似。從V.harveyi中提取的酶活可達1.8×1011LU/mg,為獲得特殊用途的BL,亦可通過誘變或基因克隆得到。各種發(fā)光細菌的基因克隆均有許多報道。
      生物活性
      Luciferase, firefly 是一種發(fā)光酶,負責(zé)螢火蟲和磕頭蟲的生物發(fā)光。
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